Combien de millilitres d'eau bactériostatique faut-il par flacon ?

Il n'y a pas de volume imposé : le volume choisi détermine la concentration selon la formule quantité de peptide divisée par volume de solvant. Un flacon de 5 mg reconstitué dans 2 mL donne 2,5 mg/mL.

Usage laboratoire uniquement

Eau bactériostatique : à quoi elle sert, comment l’utiliser, combien de temps elle se conserve

Composition, différence avec l’eau stérile, volume à utiliser, règle des 28 jours et erreurs qui coûtent un flacon de peptide : le point complet sur le solvant de reconstitution le plus utilisé en laboratoire.

Publié le 4 septembre 2026 · Équipe éditoriale Peptides France · Lecture 9 min

En bref. L’eau bactériostatique est une eau stérile pour injection additionnée de 0,9 % d’alcool benzylique, un conservateur qui inhibe la croissance des bactéries et des levures dans un flacon entamé. C’est le solvant de référence pour reconstituer un peptide lyophilisé destiné à être prélevé plusieurs fois sur plusieurs jours, là où l’eau stérile simple ne tolère qu’un seul prélèvement. Un flacon entamé se conserve environ 28 jours à 2–8 °C. Les produits présentés sur ce site sont réservés à la recherche en laboratoire, non destinés à la consommation humaine ou animale.

Dans cet article

Qu’est-ce que l’eau bactériostatique
Le rôle de l’alcool benzylique à 0,9 %
Eau bactériostatique, eau stérile, eau PPI, eau distillée
Quel volume utiliser pour un flacon de peptide
Protocole de reconstitution étape par étape
Conservation : la règle des 28 jours
Les erreurs les plus fréquentes
Où s’en procurer en France et quoi vérifier
Questions fréquentes
Références

Qu’est-ce que l’eau bactériostatique

L’eau bactériostatique — souvent abrégée BAC water, ou BWFI pour bacteriostatic water for injection — est une eau stérile pour injection à laquelle un agent conservateur a été ajouté, presque toujours de l’alcool benzylique à 0,9 % (soit 9 mg/mL).

Le mot « bactériostatique » décrit précisément ce que fait ce conservateur : il inhibe la multiplication microbienne, sans nécessairement détruire les micro-organismes déjà présents. La distinction n’est pas cosmétique. Une eau bactériostatique n’est pas une eau qui se stérilise toute seule à l’infini : c’est une eau stérile au départ, dont la stérilité reste protégée pendant une durée limitée après la première perforation du bouchon.

Le conditionnement standard est un flacon multidose en verre, scellé par un septum en caoutchouc perforable, disponible en général en 3, 10 ou 30 mL. Le septum est ce qui permet de prélever à la seringue sans jamais ouvrir le flacon à l’air libre.

Ce que ce n’est pas

Ni eau minérale, ni distillée

L’eau du commerce, distillée ou déminéralisée, n’est ni stérile ni apyrogène. Elle n’a aucune place en reconstitution.

Pas un réactif actif

Elle dissout le composé, rien de plus. Elle n’ajoute aucune propriété au peptide et n’entre pas dans la lecture des résultats.

Pas une conservation illimitée

Le conservateur a une durée d’efficacité définie. Passé ce délai, le flacon n’offre plus de garantie.

Le rôle de l’alcool benzylique à 0,9 %

L’alcool benzylique est un alcool aromatique présent naturellement dans certains fruits et huiles essentielles. Utilisé comme conservateur en préparation parentérale depuis des décennies, il agit en désorganisant la membrane cellulaire des micro-organismes, ce qui bloque leur croissance [1].

Pourquoi 0,9 % et pas une autre concentration ? Parce que c’est le seuil retenu par les monographies pharmaceutiques comme le meilleur compromis entre deux exigences opposées :

Suffisamment concentré pour inhiber les contaminants d’environnement les plus courants (Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans), selon la logique du test d’efficacité des conservateurs décrit au chapitre général USP <51>.
Suffisamment dilué pour rester chimiquement compatible avec la grande majorité des peptides et protéines, sans les dénaturer.

Les limites à connaître

Trois points méritent d’être posés clairement, parce qu’ils sont rarement expliqués.

L’effet n’est pas total. L’alcool benzylique à cette concentration est peu actif sur les spores bactériennes et sur certaines souches résistantes. C’est une protection contre la contamination ordinaire, pas une garantie absolue de stérilité dans le temps.

L’effet s’épuise. Chaque perforation du septum introduit une charge microbienne potentielle. Au fil des prélèvements et du temps, la marge de sécurité se réduit — d’où la fenêtre de 28 jours détaillée plus bas.

Il existe des contextes où on l’évite. L’alcool benzylique est documenté comme toxique chez le nouveau-né prématuré, à travers ce que la littérature appelle le gasping syndrome [2]. En recherche, il peut aussi être cytotoxique sur certaines lignées cellulaires sensibles au-delà d’une concentration finale d’environ 0,1 %. Pour un travail sur culture cellulaire, l’eau stérile sans conservateur est souvent préférée, avec un aliquotage immédiat.

Eau bactériostatique, eau stérile, eau PPI, eau distillée

C’est la confusion la plus fréquente, et elle a des conséquences concrètes. Voici les quatre types d’eau qu’on rencontre, et ce qui les sépare réellement.

Type d’eau	Composition	Prélèvements	Usage typique en laboratoire
Eau bactériostatique (BWFI)	Eau stérile pour injection + alcool benzylique 0,9 %	Multidose, ~28 jours après ouverture	Reconstitution d’un lyophilisat prélevé sur plusieurs jours ou semaines
Eau stérile pour injection (SWFI)	Eau stérile, sans conservateur	Usage unique	Reconstitution consommée immédiatement, ou protocole incompatible avec l’alcool benzylique
Eau PPI / WFI	Eau ultra-pure apyrogène, sans conservateur	Usage unique	Matière première pharmaceutique ; équivalent SWFI dans la pratique courante
Eau distillée ou déminéralisée du commerce	Non stérile, non contrôlée, non apyrogène	Aucun — inadaptée	Aucun usage en reconstitution peptidique

La règle pratique tient en une phrase : si le flacon reconstitué doit être ponctionné plus d’une fois, il faut de l’eau bactériostatique. Utiliser de l’eau stérile simple pour un flacon multidose revient à créer un milieu de culture à partir de la deuxième perforation.

À l’inverse, pour une reconstitution mono-dose utilisée dans la foulée, l’eau stérile évite d’introduire un conservateur inutile dans le système étudié.

Quel volume utiliser pour un flacon de peptide

Le volume d’eau bactériostatique ajouté ne change rien à la quantité de peptide présente dans le flacon. Il détermine uniquement la concentration de la solution obtenue, et donc le volume à prélever pour une quantité donnée.

Concentration (mg/mL) = quantité de peptide (mg) ÷ volume de solvant (mL)

Exemples chiffrés

Flacon	Volume ajouté	Concentration obtenue	Contenu de 0,10 mL (10 unités U-100)
5 mg	2 mL	2,5 mg/mL	250 µg
10 mg	2 mL	5 mg/mL	500 µg
10 mg	3 mL	3,33 mg/mL	333 µg
20 mg	2 mL	10 mg/mL	1 000 µg

Sur une seringue à insuline U-100, 1 mL correspond à 100 unités graduées. La conversion est donc directe : le volume calculé en millilitres se lit sans intermédiaire sur la graduation.

Diluer plus ou diluer moins ?

Un solvant plus abondant donne une solution plus diluée : le volume à prélever augmente, mais l’erreur de lecture sur la seringue pèse proportionnellement moins. Un solvant plus réduit donne une solution concentrée : les volumes sont petits, et la moindre imprécision de lecture représente un écart relatif plus important.

Pour un flacon de faible dosage, une dilution généreuse facilite donc la précision. Pour éviter tout calcul manuel, notre calculateur de peptides donne directement le volume à prélever à partir du dosage visé et du volume de solvant.

Protocole de reconstitution étape par étape

Ramener les deux flacons à température ambiante. Ouvrir un flacon sorti du froid fait condenser l’humidité de l’air sur la poudre et amorce l’hydrolyse. On laisse remonter en température, flacons fermés.
Désinfecter les deux septums. Tampon d’alcool isopropylique à 70 % sur le bouchon du flacon de peptide et sur celui de l’eau bactériostatique. Laisser sécher une dizaine de secondes : l’alcool encore humide n’a pas fini d’agir.
Prélever le volume calculé. Avec une seringue stérile neuve, jamais réutilisée. Chasser les bulles d’air.
Injecter lentement le long de la paroi. Point critique : on oriente l’aiguille contre la paroi interne du flacon pour que le liquide coule sur le verre, et non en jet direct sur le lyophilisat. Un jet sur la poudre projette et stresse mécaniquement le peptide.
Laisser dissoudre sans agiter. On peut faire rouler doucement le flacon entre les paumes ou le retourner deux à trois fois. Jamais de secouage : l’agitation vigoureuse favorise l’agrégation et la formation de mousse.
Vérifier l’aspect. La solution doit être limpide et incolore. Tout trouble, toute particule en suspension, toute coloration : le flacon n’est pas exploitable.
Étiqueter et réfrigérer. Date de reconstitution, concentration obtenue, numéro de lot. Puis retour à 2–8 °C sans délai.

Le détail des températures et des durées selon le type de composé est regroupé sur notre page conserver les peptides.

Solvant de reconstitution · COA Janoshik

Eau bactériostatique 10 ml

La seule eau bactériostatique de France fournie avec un certificat d’analyse Janoshik. Solution stérile et apyrogène à 0,9 % d’alcool benzylique, flacon multidose à septum perforable. Format 10 ml pour couvrir plusieurs reconstitutions. Non destinée à la consommation humaine ou animale.

Voir la fiche produit → Format 3 ml Tout le matériel

Conservation : la règle des 28 jours

Deux horloges tournent en parallèle, et elles sont souvent confondues.

Le flacon d’eau bactériostatique

Non ouvert, il se conserve jusqu’à la date de péremption indiquée par le fabricant, à température ambiante et à l’abri de la lumière. Une fois le septum perforé, la référence usuelle est de 28 jours, flacon conservé au réfrigérateur. Au-delà, l’efficacité du conservateur n’est plus considérée comme garantie et le flacon est écarté.

Le peptide reconstitué

La durée dépend de la séquence, de la concentration et de la température : il n’existe pas de valeur universelle. En pratique, une solution conservée à 2–8 °C, à l’abri de la lumière, reste généralement exploitable quelques semaines, avec une dégradation progressive et invisible à l’œil nu.

Trois règles s’appliquent sans exception :

Ne jamais congeler une solution reconstituée. Les cristaux de glace endommagent la structure du peptide. Le lyophilisat, lui, se congèle sans problème.
Ne jamais congeler le flacon d’eau bactériostatique. Risque de rupture du verre et d’altération du conservateur.
Toujours dater le flacon. Sans date, il devient impossible de distinguer un résultat aberrant d’un problème de vieillissement.

Les mécanismes de perte d’intégrité — hydrolyse, oxydation, désamidation, adsorption — sont détaillés dans notre article sur la dégradation des peptides.

Les erreurs les plus fréquentes

Utiliser de l’eau du robinet, minérale ou distillée. Minéraux, chlore, micro-organismes : contamination immédiate et interaction possible avec le composé.
Injecter le solvant en jet direct sur la poudre. Le geste le plus courant, et l’un des plus dommageables.
Secouer le flacon pour accélérer la dissolution. Une dissolution lente est normale ; certains lyophilisats mettent plusieurs minutes.
Réutiliser une seringue. Une seule ponction avec du matériel non stérile suffit à contaminer un flacon entier.
Réutiliser un flacon d’eau ouvert depuis plus d’un mois. Le conservateur n’est pas éternel.
Employer de l’eau bactériostatique pour une préparation topique. L’alcool benzylique est agressif pour la peau du visage. Pour un composé destiné à une formulation topique en recherche cosmétique, on privilégie une eau sans conservateur.
Se fier à l’aspect visuel. Une solution parfaitement limpide peut avoir perdu une part importante de peptide intact.

Où s’en procurer en France et quoi vérifier

L’eau bactériostatique n’est pas un produit courant en pharmacie d’officine en France : elle relève du consommable de laboratoire plutôt que du catalogue pharmaceutique de ville. Certaines officines peuvent la commander auprès de grossistes, avec des délais et une disponibilité variables. Les fournisseurs de laboratoire classiques, eux, exigent en général un compte professionnel.

La voie la plus directe reste le distributeur spécialisé en réactifs de recherche. Dans ce cas, quatre points méritent d’être vérifiés avant de commander :

1. La concentration

Elle doit être annoncée à 0,9 % d’alcool benzylique. Une formulation qui ne précise pas sa teneur ne permet aucune vérification.

2. Le conditionnement

Flacon en verre scellé avec septum perforable. Un contenant plastique à bouchon vissé n’offre pas les mêmes garanties entre deux prélèvements.

3. Le contrôle analytique

Un certificat d’analyse consultable est la seule façon de vérifier ce qui est annoncé. C’est là que les offres se différencient le plus.

4. La provenance

Une expédition depuis la France évite les délais de douane et les ruptures de chaîne du froid inutiles.

Chez Peptides France, l’eau bactériostatique 10 ml est fournie avec un certificat d’analyse du laboratoire indépendant Janoshik — à notre connaissance la seule référence de ce type disponible en France. Le format 3 ml convient à une reconstitution ponctuelle. L’ensemble du matériel — seringues, aiguilles, tampons — est regroupé dans la catégorie reconstitution.

Pour les fondamentaux, voir aussi notre guide complet sur les peptides et notre FAQ.

Questions fréquentes

Qu’est-ce que l’eau bactériostatique ?

C’est une eau stérile pour injection additionnée d’un conservateur, généralement de l’alcool benzylique à 0,9 %. Ce conservateur inhibe la croissance des bactéries et des levures dans le flacon une fois celui-ci entamé, ce qui autorise plusieurs prélèvements successifs sur une période limitée.

Quelle est la différence entre eau bactériostatique et eau stérile ?

L’eau stérile pour injection ne contient aucun conservateur : elle est prévue pour un usage unique, car chaque nouvelle perforation du bouchon expose la solution à une contamination sans protection. L’eau bactériostatique contient de l’alcool benzylique et tolère des prélèvements répétés pendant environ 28 jours après ouverture.

Combien de temps se conserve un flacon d’eau bactériostatique entamé ?

La référence usuelle est de 28 jours après la première perforation du septum, flacon conservé au réfrigérateur et à l’abri de la lumière. Au-delà, l’efficacité du conservateur n’est plus considérée comme garantie.

Peut-on utiliser de l’eau du robinet ou de l’eau distillée ?

Non. Ces eaux ne sont ni stériles ni apyrogènes et contiennent des minéraux, du chlore et des micro-organismes susceptibles de contaminer la solution et d’altérer le composé. Seule une eau de qualité pharmaceutique — bactériostatique ou stérile pour injection — convient.

Combien de millilitres faut-il par flacon ?

Il n’y a pas de volume imposé : le volume choisi détermine la concentration obtenue selon la formule quantité de peptide ÷ volume de solvant. Un flacon de 5 mg reconstitué dans 2 mL donne 2,5 mg/mL. Le calculateur de peptides effectue le calcul automatiquement.

Peut-on congeler de l’eau bactériostatique ou un peptide reconstitué ?

Non dans les deux cas. La congélation peut faire éclater le flacon de verre et altérer le conservateur ; sur une solution reconstituée, la formation de cristaux endommage la structure du peptide. Seul le lyophilisat, sous forme sèche, se conserve au congélateur.

Trouve-t-on de l’eau bactériostatique en pharmacie en France ?

Rarement en officine de ville : il s’agit d’un consommable de laboratoire, peu référencé dans le catalogue pharmaceutique courant. Certaines pharmacies peuvent la commander auprès de grossistes, avec des délais variables. Les distributeurs spécialisés en réactifs de recherche constituent la voie la plus directe.

L’alcool benzylique peut-il dégrader le peptide ?

À 0,9 %, il est compatible avec la grande majorité des peptides de recherche, c’est précisément la raison de ce choix de concentration. Pour certaines applications sur cultures cellulaires sensibles, ou pour une formulation topique, une eau sans conservateur est préférée.

Que faire si la solution devient trouble ?

Une solution reconstituée doit être limpide et incolore. Tout trouble, particule ou changement de teinte indique un problème de dissolution, de compatibilité ou de contamination : le flacon est écarté et n’est pas utilisé.

Réservé à la recherche. Les articles et informations produits publiés sur ce site ont une finalité exclusivement informative et éducative. Les produits proposés sont destinés uniquement à la recherche et à l’usage en laboratoire. Ils ne sont pas destinés à la consommation humaine ou animale, ne sont ni des médicaments ni des compléments alimentaires, et n’ont fait l’objet d’aucune évaluation ni autorisation en vue de diagnostiquer, traiter, guérir ou prévenir une maladie. Toute forme d’introduction dans l’organisme est strictement interdite.

Références

National Center for Biotechnology Information. « Benzyl alcohol, CID 244. » PubChem Compound Summary. pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/244
Gershanik J, Boecler B, Ensley H, McCloskey S, George W. « The gasping syndrome and benzyl alcohol poisoning. » New England Journal of Medicine, 1982;307(22):1384–1388. PMID 7133084
United States Pharmacopeia. Chapitres généraux <51> Antimicrobial Effectiveness Testing et <71> Sterility Tests. USP-NF.
Pharmacopée européenne (Ph. Eur.), monographie « Eau pour préparations injectables ». Direction européenne de la qualité du médicament (EDQM).

Eau bactériostatique : à quoi elle sert, comment l’utiliser, combien de temps elle se conserve