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La L-carnitine au laboratoire : 600 ou 1 200 mg/mL, dilutions et conservation
Concentrations molaires, solution mère, dilutions, pipetage et conservation : le guide pratique de la L-carnitine en solution.
La L-carnitine au laboratoire : 600 ou 1 200 mg/mL, dilutions et conservation
Comment manipuler une solution concentrée de L-carnitine, calculer les concentrations molaires, préparer une solution mère et des dilutions de travail, éviter les erreurs de pipetage et conserver un flacon à prélèvements multiples.
En bref
- Deux concentrations : 600 mg/mL (≈ 3,7 mol/L) et 1 200 mg/mL (≈ 7,4 mol/L), en flacons de 10 mL.
- Pas de reconstitution : la solution est prête à l’emploi, il suffit de la diluer.
- Une solution mère intermédiaire à 100 mM facilite toutes les dilutions de travail.
- Prélèvements stériles et flacon au frais, à l’abri de la lumière.
Pourquoi une solution prête à l’emploi ?
Parce que la L-carnitine en poudre absorbe très vite l’humidité de l’air. En solution, elle est plus simple à doser et à conserver.
La L-carnitine base est extrêmement soluble dans l’eau, et sa poudre est très hygroscopique : laissée à l’air, elle devient collante, ce qui rend les pesées imprécises. Une solution titrée supprime ce problème. Elle permet aussi des prélèvements précis et reproductibles, à condition de bien calculer les dilutions.
Avantage
Pas de pesée
La concentration est connue d’avance, sans erreur liée à l’humidité.
Avantage
Pas de reconstitution
Aucun solvant à ajouter, aucune étape de dissolution.
Vigilance
Très concentrée
Il faut la diluer fortement avant tout usage expérimental.
Le matériel
Un outil de mesure précis et stérile, de l’eau stérile ou un tampon, des tubes et de quoi désinfecter le bouchon.
| Matériel | Rôle |
|---|---|
| Flacon de L-carnitine | La solution concentrée, 600 ou 1 200 mg/mL |
| Outil de mesure stérile de précision | Prélever de petits volumes avec exactitude |
| Eau stérile ou tampon (PBS) | Diluer la solution |
| Tubes stériles et étiquettes | Préparer et identifier la solution mère et les dilutions |
| Lingettes à l’alcool | Désinfecter le bouchon avant chaque prélèvement |
La solution
L-Carnitine
600 ou 1 200 mg/mL · 10 mL
Dès 25 €
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Solution de reconstitution
Flacon de 10 mL
8 €
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Pour la culture cellulaire, préférez l’eau stérile ou un tampon sans conservateur : l’alcool benzylique de la solution de reconstitution peut gêner certaines cellules.
600 ou 1 200 mg/mL en concentration molaire
Avec une masse de 161,2 g/mol, 600 mg/mL correspondent à environ 3,72 mol/L et 1 200 mg/mL à environ 7,44 mol/L.
Ce sont des concentrations très élevées : les expériences sur cellules utilisent généralement la L-carnitine entre quelques dizaines de micromolaires et quelques millimolaires, soit des milliers de fois moins. La formule de conversion est simple : concentration molaire = concentration massique ÷ masse molaire.
| Concentration massique | Concentration molaire |
|---|---|
| 1 200 mg/mL | ≈ 7,44 mol/L |
| 600 mg/mL | ≈ 3,72 mol/L |
| 16,12 mg/mL | 100 mmol/L (solution mère conseillée) |
| 0,161 mg/mL | 1 mmol/L |
| 0,016 mg/mL | 100 µmol/L |
Notre calculateur aide pour les conversions, et notre article sur les unités pour éviter les confusions entre mg et mcg.
Préparer une solution mère à 100 mM
Passer par une solution intermédiaire à 100 mM évite de pipeter des volumes minuscules de solution concentrée et rend les calculs simples.
| Solution de départ | Volume à prélever | Eau stérile à ajouter | Résultat |
|---|---|---|---|
| 600 mg/mL | 27 µL | 973 µL | 1 mL à ≈ 100 mM |
| 600 mg/mL | 269 µL | 9,73 mL | 10 mL à ≈ 100 mM |
| 1 200 mg/mL | 13,4 µL | 986,6 µL | 1 mL à ≈ 100 mM |
| 1 200 mg/mL | 134 µL | 9,87 mL | 10 mL à ≈ 100 mM |
Pour plus de précision, préparez un volume plus grand (10 mL) : les erreurs relatives de pipetage sont plus faibles sur 269 µL que sur 27 µL. Mélangez doucement par retournement, puis répartissez la solution mère en portions.
Les dilutions de travail
À partir d’une solution mère à 100 mM, chaque millimolaire final correspond à 10 µL par millilitre de milieu.
| Concentration finale visée | Solution mère à 100 mM pour 1 mL | Dilution |
|---|---|---|
| 5 mM | 50 µL | 1/20 |
| 1 mM | 10 µL | 1/100 |
| 0,5 mM | 5 µL | 1/200 |
| 100 µM | 1 µL (ou 10 µL d’une dilution à 10 mM) | 1/1 000 |
- Préparer au dernier moment les dilutions les plus faibles.
- Témoin : même volume d’eau ou de tampon, sans carnitine.
- Plusieurs concentrations pour rechercher une relation dose-réponse.
Pipeter une solution concentrée
Les solutions très concentrées sont plus visqueuses que l’eau. Un pipetage lent, éventuellement en mode inverse, améliore la précision.
À 1 200 mg/mL, la solution contient plus de soluté que d’eau en masse : elle s’écoule plus lentement et adhère davantage aux parois. Aspirez lentement, attendez une seconde avant de sortir la pointe, et essuyez l’extérieur de la pointe si une goutte y reste. La technique du pipetage inverse (aspirer un peu plus que nécessaire et ne distribuer que le volume voulu) limite les erreurs avec les liquides visqueux.
1
Lentement
Aspirer et distribuer sans à-coups.
2
Attendre
Une seconde avant de sortir la pointe du liquide.
3
Rincer
Rincer la pointe dans le diluant pour récupérer tout le volume.
Points de vigilance dans le milieu
Aux concentrations de travail habituelles, la L-carnitine ne pose pas de problème. Aux fortes concentrations, il faut surveiller l’osmolarité et le pH.
Ajoutée à plusieurs millimolaires, la carnitine augmente légèrement l’osmolarité du milieu de culture. Ce n’est en général pas gênant jusqu’à quelques millimolaires, mais un témoin d’osmolarité (par exemple avec un composé inerte à la même concentration) peut être utile pour les concentrations élevées. Vérifiez aussi le pH final si vous ajoutez de grands volumes d’une solution peu tamponnée.
| Concentration finale | Vigilance |
|---|---|
| Jusqu’à 1 mM | Aucune particulière |
| 1 à 10 mM | Penser à un témoin d’osmolarité |
| Au-delà de 10 mM | Contrôler osmolarité et pH |
Prélever dans un flacon multidose
Le flacon de 10 mL permet de nombreux prélèvements. Chacun doit se faire stérilement, pour éviter de contaminer la solution restante.
- Désinfecter le bouchon à l’alcool et laisser sécher avant chaque prélèvement.
- Matériel neuf et stérile à chaque fois.
- Ne jamais réintroduire un excès de solution dans le flacon.
- Noter la date de première ouverture sur le flacon.
Conserver
Le flacon se conserve fermé, au frais et à l’abri de la lumière, selon les indications de l’étiquette. Les dilutions se préparent de préférence au moment de l’usage.
| Forme | Où ? | Précautions |
|---|---|---|
| Flacon non ouvert | Selon l’étiquette, au frais | À l’abri de la lumière |
| Flacon entamé | Réfrigérateur, entre 2 et 8 °C | Prélèvements stériles, quelques semaines au plus |
| Solution mère à 100 mM | Congélateur, en portions | Une portion par expérience, sans recongeler |
| Dilutions de travail | Préparées le jour même | Ne pas conserver |
La L-carnitine est une molécule chimiquement stable en solution, mais le risque principal est la contamination microbienne d’un flacon souvent ouvert. Les règles générales sont dans notre guide de conservation.
Les erreurs à éviter
La plupart des erreurs viennent des calculs et du pipetage de la solution concentrée.
Erreur
Utiliser la solution pure
À 3,7 ou 7,4 mol/L, elle doit être diluée des milliers de fois.
Erreur
Confondre les flacons
600 et 1 200 mg/mL : le facteur de dilution change du simple au double.
Erreur
Pipeter trop vite
La viscosité fausse les petits volumes.
Erreur
Contaminer le flacon
Un prélèvement non stérile compromet tout le flacon.
Erreur
Oublier le témoin
Sans témoin, impossible d’isoler l’effet de la carnitine.
Erreur
Mélanger les formes
Tartrate ou acétyl-carnitine n’ont pas la même masse : les calculs changent.
Pour les différences de masse entre les formes, voir les formes de L-carnitine.
Quelle concentration choisir ?
Les deux flacons contiennent la même molécule. Le 1 200 mg/mL revient moins cher au gramme ; le 600 mg/mL est un peu plus simple à pipeter.
| Format | Quantité de L-carnitine | Prix | Prix au gramme |
|---|---|---|---|
| 600 mg/mL · 10 mL | 6 g | 25 € | ≈ 4,17 € |
| 1 200 mg/mL · 10 mL | 12 g | 40 € | ≈ 3,33 € |
Dans les deux cas, un seul flacon permet de préparer des centaines de millilitres de solution mère à 100 mM : la quantité n’est presque jamais le facteur limitant.
Un exemple de protocole complet
Pour tester l’effet de la L-carnitine sur l’oxydation des acides gras dans des cellules en culture, voici un enchaînement type.
1
Solution mère
Préparer 10 mL à 100 mM à partir du flacon, puis répartir en portions.
2
Plan de plaque
Prévoir un témoin, trois concentrations (0,1 ; 0,5 et 2 mM) et des répétitions.
3
Dilutions
Diluer la solution mère dans le milieu le jour même.
4
Exposition
Ajouter les dilutions aux cellules pour la durée prévue.
5
Mesure
Consommation d’oxygène ou oxydation d’un acide gras marqué.
6
Carnet
Noter le lot, les volumes, les dates et les observations.
Les mesures d’oxydation des acides gras sont détaillées dans L-carnitine et mitochondries.
FAQ : la L-carnitine au laboratoire
Faut-il reconstituer la L-carnitine ?
Non. Elle est fournie en solution prête à l’emploi, à 600 ou 1 200 mg/mL. Il suffit de la diluer.
Quelle est la concentration molaire d’une solution à 600 mg/mL ?
Environ 3,72 mol/L, avec une masse molaire de 161,2 g/mol. À 1 200 mg/mL, environ 7,44 mol/L.
Comment préparer 1 mL de L-carnitine à 100 mM ?
Prélevez 27 µL de solution à 600 mg/mL (ou 13,4 µL à 1 200 mg/mL) et complétez à 1 mL avec de l’eau stérile.
Avec quoi diluer la L-carnitine ?
Avec de l’eau stérile ou un tampon comme le PBS. Pour la culture cellulaire, évitez les solvants contenant un conservateur.
Comment conserver un flacon entamé ?
Au réfrigérateur, à l’abri de la lumière, avec des prélèvements toujours stériles, et pendant quelques semaines au plus.
Quelle différence entre les flacons de 600 et 1 200 mg/mL ?
La même molécule, en concentration double. Le 1 200 mg/mL est moins cher au gramme ; le 600 mg/mL est un peu plus facile à pipeter.
Pour aller plus loin
Le guide complet de la L-carnitine
Les formes de L-carnitine
L-carnitine, Lipo-C ou LC 216
Calculateur
Avertissement — Cet article décrit des manipulations de laboratoire. Les solutions de L-carnitine proposées par Peptides France sont des réactifs de recherche destinés exclusivement au laboratoire ; elles ne sont pas destinées à la consommation humaine ou animale.
