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La tésamoréline au laboratoire : reconstitution, concentration et conservation
Solvant, concentration, calculs molaires et conservation : le guide pratique de la tésamoréline au laboratoire.
La tésamoréline au laboratoire : reconstitution, concentration et conservation
Comment dissoudre un flacon de 5, 10 ou 20 mg sans abîmer ce peptide long de 44 acides aminés, calculer une concentration en mg/mL et en micromolaire, limiter l’oxydation et conserver poudre et solution.
En bref
- La tésamoréline est fournie en poudre lyophilisée, en flacons de 5, 10 ou 20 mg.
- Elle se dissout dans l’eau bactériostatique ou l’eau stérile.
- Peptide long et porteur d’une méthionine, elle craint l’agitation, la chaleur, l’air et la lumière.
- 1 mg de tésamoréline correspond à environ 0,195 micromole.
Les particularités de la tésamoréline
Avec 44 acides aminés, la tésamoréline est un peptide long. Elle contient une méthionine et une asparagine sensibles à la dégradation, et elle supporte mal l’agitation.
Les peptides longs se replient et s’agrègent plus facilement que les petits peptides, surtout quand on les secoue ou qu’on les chauffe. La tésamoréline a en plus deux points faibles connus dans sa séquence : la méthionine en position 27, qui s’oxyde au contact de l’air et de la lumière, et l’asparagine en position 8, qui peut se transformer lentement en solution (désamidation). Ces deux réactions modifient le peptide et peuvent réduire son activité. D’où des précautions simples mais importantes.
| Caractéristique | Conséquence pratique |
|---|---|
| 44 acides aminés | Ne pas secouer, ne pas chauffer |
| Méthionine en position 27 | Limiter l’air et la lumière |
| Asparagine en position 8 | Ne pas conserver longtemps en solution |
| Masse ≈ 5 136 g/mol | Peu de molécules par milligramme |
Pour comprendre ces réactions, voir notre article sur la dégradation des peptides.
Le matériel nécessaire
Le flacon, un solvant stérile, un outil de mesure précis et stérile, de quoi désinfecter et de quoi étiqueter.
| Matériel | Rôle |
|---|---|
| Flacon de tésamoréline | La poudre, revenue à température ambiante |
| Eau bactériostatique ou stérile | Le solvant |
| Outil de mesure stérile | Prélever un volume précis |
| Lingettes à l’alcool | Désinfecter les bouchons |
| Tubes opaques et étiquettes | Préparer des portions et noter concentration et date |
Le peptide
Tésamoréline
5, 10 ou 20 mg
Dès 70 €
Voir la fiche →
Eau bactériostatique
Flacon de 3 mL
5 €
Voir la fiche →
Eau bactériostatique
Flacon de 10 mL
8 €
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Choisir le solvant
L’eau bactériostatique convient pour une solution utilisée sur plusieurs jours ; l’eau stérile pour un usage immédiat ou la culture cellulaire.
Courant
Eau bactériostatique
Son conservateur (alcool benzylique) limite la prolifération bactérienne pour une solution utilisée plusieurs jours.
Culture cellulaire
Eau stérile
Sans conservateur : pour les cellules sensibles et les solutions préparées au moment de l’usage.
À éviter
Eau du robinet
Non stérile, chargée en minéraux et en micro-organismes.
Pour choisir le format, voir eau bactériostatique 3 mL ou 10 mL.
Reconstituer pas à pas
Lentement et sans agiter : le solvant coule le long de la paroi, puis on fait tourner doucement le flacon jusqu’à dissolution complète.
1
Tempérer
Sortir le flacon du froid 15 à 20 minutes avant, pour éviter la condensation.
2
Désinfecter
Lingette à l’alcool sur les bouchons du flacon et du solvant.
3
Verser doucement
Diriger le solvant contre la paroi, jamais en jet sur la poudre.
4
Faire tourner
Rouler le flacon entre les doigts. Ne jamais secouer.
5
Laisser reposer
Quelques minutes si besoin, jusqu’à une solution limpide.
6
Étiqueter
Concentration, date, solvant et numéro de lot.
Les erreurs classiques sont détaillées dans les 10 erreurs de reconstitution.
Calculer la concentration
Concentration = quantité de peptide ÷ volume de solvant. Le tableau couvre les trois formats.
| Flacon | Volume de solvant | Concentration | Soit |
|---|---|---|---|
| 5 mg | 1 mL | 5 mg/mL | 5 000 mcg/mL |
| 5 mg | 2 mL | 2,5 mg/mL | 2 500 mcg/mL |
| 10 mg | 2 mL | 5 mg/mL | 5 000 mcg/mL |
| 10 mg | 4 mL | 2,5 mg/mL | 2 500 mcg/mL |
| 20 mg | 4 mL | 5 mg/mL | 5 000 mcg/mL |
| 20 mg | 8 mL | 2,5 mg/mL | 2 500 mcg/mL |
Vérifiez la contenance du flacon avant d’ajouter le solvant. Utilisez notre calculateur et notre article sur les unités.
En concentration molaire
Avec une masse d’environ 5 136 g/mol, 1 mg/mL de tésamoréline correspond à environ 0,195 mmol/L, soit 195 µM.
Les études sur cellules hypophysaires utilisent des concentrations de l’ordre du nanomolaire à quelques dizaines de nanomolaires, car le récepteur de la GHRH est très sensible. Il faut donc diluer fortement la solution de départ, en passant par des dilutions intermédiaires.
| Concentration massique | Concentration molaire |
|---|---|
| 5 mg/mL | ≈ 0,97 mmol/L |
| 1 mg/mL | ≈ 195 µmol/L |
| 5,136 mg/mL | 1 mmol/L (solution « ronde ») |
| 5,1 µg/mL | ≈ 1 µmol/L |
| 5,1 ng/mL | ≈ 1 nmol/L |
Si le certificat d’analyse indique une masse différente (sel d’acétate, par exemple), utilisez cette valeur. Pour les petits volumes, préférez des dilutions successives au dixième plutôt qu’un seul grand facteur de dilution.
Conserver la tésamoréline
Le froid, l’obscurité et le moins d’air possible. En solution, la tésamoréline se conserve moins longtemps qu’un petit peptide.
| Forme | Où ? | Précautions |
|---|---|---|
| Poudre, flacon fermé | Réfrigérateur ; congélateur pour un stockage long | À l’abri de la lumière et de l’humidité |
| Solution (eau bactériostatique) | Réfrigérateur, entre 2 et 8 °C | À l’abri de la lumière, quelques semaines au plus |
| Solution mère pour culture cellulaire | Congélateur, en petites portions | Une portion par expérience, jamais recongelée |
| Dilutions de travail | Préparées le jour même | Ne pas conserver |
Pour limiter l’oxydation, remplissez les tubes presque à ras bord et utilisez des tubes opaques. Tous les gestes sont dans notre guide de conservation et notre checklist.
Vérifier l’aspect
Une bonne solution de tésamoréline est limpide et incolore.
- Limpide et incolore : aspect attendu.
- Légère mousse : le flacon a été agité ; laisser reposer.
- Trouble ou filaments : possible agrégation du peptide ; ne pas utiliser sans vérifier.
- Particules ou coloration : contamination ou dégradation ; écarter la solution.
Les erreurs à éviter
Les mêmes pièges reviennent avec tous les peptides lyophilisés, et la tésamoréline y est particulièrement sensible.
Erreur
Secouer
Mousse et agrégation : le peptide peut perdre sa qualité.
Erreur
Laisser à la lumière
La méthionine s’oxyde plus vite.
Erreur
Garder la solution trop longtemps
La désamidation progresse avec le temps.
Erreur
Recongeler
Chaque cycle de gel et dégel abîme le peptide.
Erreur
Calculer en mg/mL
Les publications raisonnent en nanomolaire : convertissez.
Erreur
Confondre avec le mélange
Le mélange avec l’ipamoréline n’a pas les mêmes concentrations.
Pour le mélange, voir tésamoréline et ipamoréline.
Le carnet de laboratoire
Noter chaque étape évite les erreurs et permet de reproduire un protocole.
| À noter | Exemple |
|---|---|
| Peptide et lot | Tésamoréline, numéro de lot |
| Masse utilisée pour les calculs | 5 136 g/mol, ou la valeur du certificat |
| Date de reconstitution | Jour où le flacon a été dissous |
| Solvant et volume | Eau stérile, 2 mL |
| Concentration | 5 mg/mL, soit ≈ 0,97 mM |
| Portions | Nombre de tubes, volume, emplacement |
Quel format choisir ?
Le bon format est celui que vous utiliserez entièrement pendant la durée de conservation de la solution.
| Format | Prix | Prix au mg | Pour quel usage ? |
|---|---|---|---|
| 5 mg | 70 € | 14,00 € | Essai ponctuel, culture cellulaire |
| 10 mg | 100 € | 10,00 € | Série d’expériences sur quelques semaines |
| 20 mg | 180 € | 9,00 € | Protocole intensif, portions congelées |
Pour tous les critères d’achat, voir acheter de la tésamoréline en France.
FAQ : la tésamoréline au laboratoire
Avec quoi reconstituer la tésamoréline ?
Avec de l’eau bactériostatique pour une solution utilisée sur plusieurs jours, ou de l’eau stérile pour la culture cellulaire et l’usage immédiat.
Quelle concentration avec un flacon de 10 mg ?
10 mg dans 2 mL donnent 5 mg/mL, soit environ 0,97 mM.
Combien de micromoles dans 1 mg de tésamoréline ?
Environ 0,195 micromole, pour une masse d’environ 5 136 g/mol.
Faut-il secouer le flacon ?
Non. Peptide long, la tésamoréline est sensible à l’agitation : on fait couler le solvant le long de la paroi puis on fait tourner doucement.
Combien de temps se conserve la tésamoréline reconstituée ?
Au réfrigérateur et à l’abri de la lumière, quelques semaines au plus. Pour un usage plus long, répartir en portions congelées.
Pourquoi protéger la tésamoréline de la lumière ?
Parce que sa méthionine en position 27 s’oxyde plus vite à la lumière et à l’air, ce qui modifie le peptide.
Pour aller plus loin
Le guide complet de la tésamoréline
Acheter de la tésamoréline
Calculateur de peptides
Conserver les peptides
Avertissement — Cet article décrit des manipulations de laboratoire. La tésamoréline proposée par Peptides France est un peptide de recherche destiné exclusivement au laboratoire ; elle n’est pas destinée à la consommation humaine ou animale.
